悬浮细胞电穿孔转染参数的选择研究

• 作者: 刘宏宇 樊占威 王晗 王柏春
• 来源期刊: 黑龙江医学
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔转染 悬浮细胞 转染参数 优化
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 893-895,902
• 分类号: R-332
• 字数: 3092字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5775.2010.12.005

摘要

目的 以凋亡抑制蛋白家族成员Survivin为目的 基因,对采用电穿孔转染悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的各种参数进行选择,以提高转染效率.方法 通过选择不同的电压、温度、细胞状态等转染参数,采用不同参数组合将化学合成靶向Survivin的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察细胞计数,台盼兰拒染试验来评估siRNA的转染率和细胞存活率.结果 小鼠原代淋巴细胞在350 V,40 μs条件下,可获得最大转染率,约为31% ;良好的细胞状态以及低温条件等参数均可获得更好的转染效果.结论 电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过选择经优化的针对悬浮细胞的转染参数,可以获得较高的转染率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊占威	哈尔滨医科大学附属第一医院心血管外科	6	53	4.0	6.0
2	刘宏宇	哈尔滨医科大学附属第一医院心血管外科	88	229	8.0	12.0
3	王柏春	哈尔滨医科大学附属第一医院心血管外科	41	167	7.0	11.0
4	王晗		26	31	4.0	4.0