猪繁殖与呼吸综合征病毒M+N基因重组腺病毒载体的构建

• 作者: 徐娜 李宝玉 柳纪省
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸系统综合征病毒 M+N 基因 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 168-171
• 分类号: S8
• 字数: 2602字
• 语种: 中文

摘要

本研究构建了M+N基因的重组腺病毒栽体.首先用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因,将两者用口蹄疫病毒2A序列串联起来,将连接好的M+N基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经筛选获得了重组质粒pAdTrack-CMV/M+N;然后在大肠杆菌BJ5183内将此重组质粒和腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组,获得了插有外源基因的重组腺病毒质粒pAd/M+N;最后,经Pac Ⅰ酶切线性化后转染HEK-293细胞,成功获得含有M+N基因的重组腺病毒,为重组腺病毒活载体疫苗的研究奠定基础.