RNA干扰治疗肝纤维化的实验研究

• 作者: 徐威 王鲁文 詹娜
• 来源期刊: 疑难病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β1 小干扰RNA 肝纤维化 小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 901-903
• 分类号: R5
• 字数: 3227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6450.2010.12.010

摘要

目的 观察转化生长因子(TGF-β1)小干扰RNA(siRNA)对小鼠免疫性肝纤维化的阻断作用.方法 设计3条针对TGF-β1不同靶位的短发夹RNA(shRNA),以及1条无关对照序列(HK),克隆至pGenesil-1质粒中,构建重组真核表达载体pGenesil-TGF-β1-m1、pGenesil-TGF-β1-m2、pGenesil-TGF-β1-m3和pGenesil-HK.30只雄性昆明小白鼠随机分为6组:正常组、模型组、无关序列对照组(pGenesil-HK)、序列1治疗组(pGenesil-TGF-β1-m1)、序列2治疗组(pGenesil-TGF-β1-m2)、序列3治疗组(pGenesil-TGF-β1-m3).采用尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)制备免疫性肝纤维化动物模型.3个序列治疗组、无关序列对照组分别于第2、4、6周,在Con A注射后24 h内,尾静脉高压注射pGenesil-TGF-β1-m1、pGenesil-TGF-β1-m2、pGenesil-TGF-β1-m3和pGenesil-HK.第7周处死全部小鼠.常规生化方法测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量;应用半定量RT-PCR技术检测肝组织内TGF-β1、Smad3、Smad7、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达.结果 治疗组小鼠HYP较模型组明显降低(P<0.01);RT-PCR显示治疗组肝脏内TGF-β1、Smad3及α-SMA mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),而Smad7 mRNA表达增强(P<0.01).在3个治疗组中,pGenesil-TGF-β1-m1治疗组的疗效最佳.结论 TGF-β1 siRNA能有效抑制小鼠免疫性肝纤维化的发生,其机制可能是抑制肝内TGF-β1、Smad3及α-SMA表达,并促进Smad7表达,从而下调HSC的激活信号,减少胶原合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐威	武汉大学人民医院内科	15	69	4.0	7.0
2	王鲁文	武汉大学人民医院感染科	58	329	9.0	15.0
3	詹娜	武汉大学人民医院病理科	44	106	5.0	7.0