蛋白质在金属螯合亲和色谱中的竞争洗脱

• 作者: 李蓉 王小刚 王燕 郑建斌 陈国亮
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 金属螯合亲和色谱 保留行为 蛋白质 竞争剂
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 493-497
• 分类号: O6
• 字数: 3882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2010.00493

摘要

以细胞色素C和溶菌酶为代表,研究了蛋白质在强亲和性金属螯合柱(IDA-Cu(Ⅱ))上的保留行为.考察了竞争剂、缓冲体系对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响.发现在PBS和NaAc-HAc缓冲体系用咪唑(Imid)和甘氨酸(Gly)作竞争剂,可使蛋白质得到较好分离;在Gly和Imid竞争体系,分别研究了pH值变化对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响.为使蛋白质在IDA-Cu柱上得到有效分离且减少固定金属Cu2+的流失,对Gly体系,最好采用竞争置换和降低pH值相结合的方式进行洗脱.对Imid体系,溶液pH值应控制在6.0为宜,低pH值下蛋白质则不宜被洗脱.结果表明,竞争剂浓度与蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上的保留关系均符合计量置换模型.随着竞争剂浓度的增加,蛋白质的保留值减小.保留因子(k')的对数与竞争剂浓度倒数(1/[D])的对数具有良好的线性关系,其线性相关系数分别在0.984 和0.986以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑建斌	西北大学分析科学研究所	99	1114	18.0	27.0
2	王小刚	西北大学化工学院	25	243	8.0	14.0
3	王燕	西北大学化工学院	15	104	6.0	10.0
4	李蓉	西北大学化工学院	21	187	7.0	13.0
8	陈国亮	西北大学化工学院	20	260	8.0	15.0