重组蛋氨酸裂解酶的表达、复性及活性研究

• 作者: 于源华 夏立亮 孔晨虹 徐顺利 杨佳新 蒋琴
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋氨酸裂解酶 同型半胱氨酸 基因表达 包涵体 复性
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 189-193
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 4326字
• 语种: 中文

摘要

探索以包涵体形式表达的重组蛋氨酸裂解酶的纯化、复性方法,并对其活性进行检测.将阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶重组表达载体PET-15b-mgl1转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并对表达条件进行优化,获得大量表达.通过对包涵体的纯化及复性研究,检测重组蛋氨酸裂解酶的免疫活性及酶活性.Western blotting结果表明,重组蛋氨酸裂解酶免疫小鼠制备的多抗可以和从阴道毛滴虫中提取的天然蛋氨酸裂解酶发生特异性反应.活性检测结果显示复性蛋氨酸裂解酶有活性,复性效率达到25%左右.以包涵体形式表达的蛋氨酸裂解酶经变性、纯化及复性后,获得大量有活性的酶,为深入了解其结构、功能及酶学性质,开展其在临床检测中的应用研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于源华	长春理工大学生命科学技术学院	110	396	10.0	14.0
2	孔晨虹		2	13	2.0	2.0
3	夏立亮	长春理工大学生命科学技术学院	3	18	3.0	3.0
4	徐顺利		6	11	2.0	3.0
5	蒋琴	长春理工大学生命科学技术学院	2	12	2.0	2.0
6	杨佳新	长春理工大学生命科学技术学院	3	14	2.0	3.0