猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

• 作者: 侯韶毅 刘芳 卢桂娟 张宁 李茂宁 肖爱欢 谢丽华 陆有飞 韦英益 高永锐 黄伟坚
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: ORF2截短基因 重组质粒 间接免疫荧光试验 组合免疫 免疫保护效果
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: S852.4
• 字数: 3327字
• 语种: 中文

摘要

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况.将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测.结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达.在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性.免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组.由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用.