不同血清微环境对大鼠骨髓间充质干细胞体外培养的影响

• 作者: 李勇华 王丽萍 简维雄 袁肇凯 郑景辉 黄献平
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 微环境 细胞培养 骨髓间充质干细胞 方法 血清 大鼠
• 年，卷（期）: 2010,（14）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 2497-2502
• 分类号: R394.2
• 字数: 7035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.14.006

摘要

背景:骨髓间充质干细胞在培养过程中,常在基础培养基中添加一定的血清,最常见的是小牛血清和胎牛血清,但这存在着一定的生物安全性件隐患.目的:观察不同血清微环境对大鼠骨髓间充质干细胞体外培养的影响.方法:自成年大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞,采用全骨髓贴壁法培养.分别以下列血清微环境培养:自身血清组:分离细胞后原代用含大鼠自身血清的培养基培养,传代后换用含胎牛血清的培养基培养:同种异体衄清组:分离细胞后原代用含同种异体血清的培养基培养,以后用胎牛血清培养基培养;胎牛血清组:分离后用含胎牛血清培养基培养,以后一直用含胎牛血清培养基培养:DMEM组:分离细胞后原代用不含血清的DMEM培养基培养,传代后换用含胎牛血清的培养基培养.在倒置相差显微镜下观察细胞的形态;细胞的贴比率:生长曲线;流式细胞仪观测细胞表面CD11b、CD45和CD90表达.结果与结论:大鼠自身血清微环境及同种异体血清微环境细胞形态均一性、在融合度均高于其他组;首次传代天数低于其他组.24,48,72 h贴比率自身血清组、同种异体血清组和胎牛血清组均高于DMEM组(P＜0.01).在细胞生长曲线中大鼠自身血清组倍增速率最快,其次为同种异体血清组,再者为胎牛血清组,而DMEM组细胞未见明显倍增现象.流式细胞仪检测含血清培养基培养条件下各组第3代细胞CD11b和CD45阳性细胞率均达到98%以上,CD90阳性率小于2%,可以得到纯度较高的骨髓间充质干细胞.但是在无血清微环境条件下,CD11b的阳性率为95.83%、CD90阳性率达2.07%,而CD45阳性率仅为64.79%.可见无血清环境下培养的骨髓间充质干细胞纯度明显低于含血清微环境.提示大鼠自身血清微环境下更有利于骨髓间充质干细胞的贴壁、生长及纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁肇凯	湖南中医药大学中医诊断研究所	156	2198	25.0	39.0
2	黄献平	湖南中医药大学中医诊断研究所	97	1598	22.0	36.0
3	简维雄	湖南中医药大学中医诊断研究所	77	287	10.0	13.0
4	郑景辉	湖南中医药大学中医诊断研究所	15	87	6.0	9.0
5	李勇华	湖南中医药大学中医诊断研究所	16	109	6.0	10.0
6	王丽萍	湖南中医药大学中医诊断研究所	11	115	6.0	10.0