细粒棘球蚴FABP基因的原核表达及蛋白鉴定

• 作者: 周华从 李洁 王志钢 白健 赵云龙 郝慧芳 金永 陈献威 高连山
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细粒棘球蚴 脂肪酸结合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 92-95
• 分类号: Q5
• 字数: 2666字
• 语种: 中文

摘要

构建原核表达载体pET-FABP,优化表达条件,采用免疫学方法鉴定纯化的FABP融合蛋白.载体pMD19-T-FABP和pET-44a(+)经 EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,将回收的FABP片段与pET-44a(+)连接,构建原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件,纯化FABP融合蛋白,Western blotting鉴定.成功构建了原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌中高效表达.纯化后的蛋白经SDS-PAGE 和Western blotting鉴定正确.构建的表达载体pET-FABP 可以在大肠杆菌中大量表达Nus-FABP 融合蛋白,为进一步研制FABP 亚单位疫苗奠定了基础.