番木瓜β-Gal基因的克隆分析与植物表达载体构建

• 作者: 何玮毅 卢秉国 申艳红 陈晓静
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜 β-半乳糖苷酶 果实特异性启动子 双T-DNA植物表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用及组织培养
• 页码范围: 217-223
• 页数: 7页
• 分类号: S667.9|Q789
• 字数: 5277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2010.02.011

摘要

番木瓜果实采后贮藏期间的迅速软化与β-Gal基因的表达密切相关.利用常规PCR结合反向PCR技术,分离了一条4501 bp的番木瓜β-Gal基因组序列.其共含有17个内含子,外显子部分与相应的cDNA序列只有1个碱基的差异.生物信息学分析结果表明,该番木瓜β-GAL属于糖苷水解酶超级家族42中家族35的成员,在进化过程中与拟南芥的亲缘关系较近,与鳄梨和北美云杉则较远.同时,它还具有一段定位于胞外的信号肽,再次表明其可能参与了果肉细胞壁的降解和果实软化.进一步分离了β-Gal基因启动子,初步验证了其果实表达特异性.将该启动子替换载体p2301/TTRG上的CaMV 35S启动子,构建出RNAi-β-Gal双T-DNA植物表达载体.酶切分析和PCR检测结果表明,载体p2301/BPTTRG已被成功导入农杆菌,可用于后续的遗传转化研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何玮毅	福建农林大学园艺学院	13	107	5.0	10.0
10	陈晓静	福建农林大学园艺学院	50	367	11.0	17.0
14	申艳红	福建农林大学园艺学院	28	137	7.0	10.0
18	卢秉国	福建农林大学园艺学院	18	136	8.0	11.0