不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较

• 作者: 吴静 杨筱曦 王彦平 肖盼 郭娴吟 陈剑
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜 间充质干细胞 细胞分离
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1033-1037
• 分类号: R363
• 字数: 4464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.05.044

摘要

目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法.方法:将新鲜羊膜组织分成4片6 cm×6 cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原酶Ⅳ组;第3组:先剪碎+胶原酶Ⅱ组;第4组:先剪碎+胶原酶Ⅳ组.对这4组原代培养HAMSCs进行存活数、形态学观察比较,第3代 HAMSCs抗原检测及成脂成骨诱导分化实验.结果:第1组和第2组的HAMSCs存活数高于第3组和第4组(P<0.05).第1组和第2组的HAMSCs成份较第3组和第4组纯净,后2组夹杂着一些团状的人羊膜上皮细胞(HAECs).抗原结果显示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105表达阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达阴性,Vimentin、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、telomerase结果阳性.成脂成骨诱导分化实验成功.结论:通过先将人羊膜用胰蛋白酶+EDTA消化液消化后,再将HAECs刮除干净,然后剪碎再用胶原酶消化的改进方法对HAMSCs保护较好,较易提取,获取细胞量和纯度均较传统方法高.胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅳ2种消化酶对HAMSCs的提取影响不大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈剑	暨南大学附属第一医院眼科	126	747	14.0	21.0
2	王彦平	暨南大学医学院病理生理学系	79	421	11.0	15.0
3	吴静	暨南大学医学院眼科研究室	63	406	10.0	17.0
4	杨筱曦	暨南大学附属第一医院眼科	10	55	5.0	7.0
5	肖盼	暨南大学附属第一医院眼科	3	14	1.0	3.0
6	郭娴吟	暨南大学附属第一医院眼科	2	13	1.0	2.0