糖基化修饰促进内含肽剪接的凝血因子Ⅷ的分泌和活性

• 作者: 刘泽隆 屈慧鸽 朱甫祥 缪静 迟晓艳
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 因子Ⅷ 糖基化 蛋白质剪接 内含肽
• 年，卷（期）: 2010,（36）
• 页码范围: 2570-2574
• 分类号: R5
• 字数: 4421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.36.013

摘要

目的 观察糖基化修饰对内含肽剪接的B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)分泌的影响.方法 将含有6个潜在的天冬酰胺糖基化位点(N6)的FⅧ的B区226个氨基酸引入BDD-FⅧ重链,用双载体转融合内含肽的此重链和轻链基因(N6HCIntN和IntCLC)至培养的293细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Coatest发色法分别检测基因共转染细胞分泌至培养上清的剪接BDD-FⅧ蛋白量和凝血生物活性.结果 共转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞上清中BDD-FⅧ蛋白浓度为(123±18)ng/ml,凝血活性为(0.94±0.11)U/ml,明显高于共转染内含肽融合的无糖基化修饰重链(HCIntN)和IntCLC基因细胞上清的BDD-FⅧ蛋白浓度[(86±12)ng/ml]和凝血活性[(0.65±0.07)U/ml,均P＜0.05].分别转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞混合培养后的上清中亦检测到剪接的BDD-FⅧ蛋白和凝血活性[(18±6)ng/ml,(0.15±0.05)U/ml].结论 糖基化修饰可促进内含肽剪接的BDD-FⅧ的分泌并表现出不依赖细胞机制的蛋白质剪接功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	屈慧鸽	鲁东大学生命科学学院生物医学研究所	72	330	10.0	15.0
2	刘泽隆	鲁东大学生命科学学院生物医学研究所	49	99	7.0	9.0
3	缪静	鲁东大学生命科学学院生物医学研究所	57	250	10.0	14.0
4	朱甫祥	鲁东大学生命科学学院生物医学研究所	38	21	3.0	4.0
5	迟晓艳	鲁东大学生命科学学院生物医学研究所	47	54	4.0	6.0