四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系的正交优化

• 作者: 周国英 宋文珠 李春丽 杨路存 许璟瑛 陈桂琛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 四数獐牙菜 ISSR-PCR 正交设计 体系优化
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 123-128
• 分类号: Q94
• 字数: 4910字
• 语种: 中文

摘要

采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系中的4种主要因素(Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,PCR结果用统计软件SPSS16.0分析.结果显示,Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP这3因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中Mg2+的浓度影响最大.筛选出各反应因素的最佳水平,建立四数獐牙菜ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为3.0 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L引物,1U Taq DNA聚合酶,40 ngDNA,2.5 μL 10×buffer.这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行四数獐牙菜遗传多样性分析以及物种保护奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周国英	中国科学院西北高原生物研究所	97	1412	21.0	33.0
2	陈桂琛	中国科学院西北高原生物研究所	156	2512	25.0	43.0
3	李春丽	中国科学院西北高原生物研究所	5	48	3.0	5.0
7	许璟瑛	中国科学院西北高原生物研究所	4	20	2.0	4.0
11	杨路存	中国科学院西北高原生物研究所	18	157	8.0	12.0
15	宋文珠	中国科学院西北高原生物研究所	12	122	7.0	11.0