TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进

• 作者: 孙凯亮 符永恒 董小莉 谭宁 邓宇珺
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌细胞凋亡 冰冻切片 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1038-1040
• 分类号: R364
• 字数: 3229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.05.045

摘要

目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道.本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法.方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2 μm)和冰冻切片(3 μm)进行TUNEL染色.分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组.石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察.结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01).结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙凯亮		5	53	3.0	5.0
2	谭宁		6	50	3.0	6.0
3	符永恒		3	40	2.0	3.0
4	邓宇珺		3	37	2.0	3.0
5	董小莉		1	34	1.0	1.0