9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响

• 作者: 刘芬 向阳 杜雷 杨毅宁 陈邦党 马依彤 高霞
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 9型重组腺相关病毒 增强型绿色荧光蛋白 心肌细胞 转染
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 18-20
• 分类号: R331.3
• 语种: 中文

摘要

目的:研究含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的9型重组腺相关病毒(rAAV9)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对细胞生长的影响.方法:rAAV9-EGFP按转染复数(MOI)1×10~5、1×10~6、1×10~7转染H9C2细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察H9C2细胞中EGFP阳性表达情况,采用流式细胞仪检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染效率.观察转染后细胞生长形态,并用Alamar Blue法检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖影响.结果:转染后第1天,MOI=1×10~6、1×10~7组中EGFP开始表达;第2天,MOI=1×10~5组开始表达,各组EGFP表达强度随MOI值的增高而增强,同时EGFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第4天达到高峰,此时流式细胞术检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染率分别为MOI=1×10~5组:(14.1±0.2)%、MOI=1×10~6组:(35.1±4.8)%、MOI=1×10~7组:(56.8±0.1)%.rAAV9-EGFP转染H9C2细胞后,细胞生长及形态正常,Alamar Blue法进一步检测表明转染组对H9C2细胞增殖无影响.结论:rAAV9-EGFP能够有效地转染H9C2细胞,且rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖无明显抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马依彤	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	329	1439	16.0	22.0
2	杨毅宁	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	163	632	12.0	14.0
3	陈邦党	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	37	142	6.0	9.0
4	刘芬	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	71	231	8.0	10.0
5	向阳	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	83	447	10.0	15.0
6	高霞	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	3	21	2.0	3.0