去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因与血管平滑肌细胞增殖

• 作者: 周炜 曹文静 郭小梅 陈光慧 陈莉莉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体融合素2基因 血管平滑肌细胞 增殖:磷酸化 组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1322-1326
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 1832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.07.043

摘要

背景:线粒体融合素2基因作用于血管平滑肌细胞Ras蛋白,通过胞外信号调节蛋白激酶1/2通路抑制细胞增殖.线粒体融合素2基因氨基酸序列第442位丝氨酸为蛋白激酶A磷酸化位点,与其磷酸化状态密切相关,能参与其功能调控.目的:观察大鼠线粒体融合素2基因在去除蛋白激酶A磷酸化位点后对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其相关信号通路.方法:利用已构建的携带绿色荧光蛋白基因、线粒体融合素2基因和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的3种重组腺病毒,感染大鼠主动脉血管平滑肌细胞,将其传代培养3～10代后以抽签法随机分为4组:①不加干预的对照组.②感染携带绿色荧光蛋白的对照组(Adv-GFP组).⑨感染携带线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2组).④感染携带去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2-PKA(△)组).激光共聚焦显微镜观察完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在细胞中的定位.Westernblot检测p-ERK1/2表达水平及完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中的表达.MTT法绘制细胞生长曲线.结果与结论:完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中均表达蛋白特异性条带.两种基因表达产物都主要分布于线粒体外膜.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组吸光度值在第3,4,5,6天都显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组吸光度值无明显变化.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组p-ERK1/2表达水平显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组无明显变化.提示去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因定位于线粒体外膜,对血管平滑肌细胞的增殖无拮抗作用,对胞外信号调节蛋白激酶1/2通路无抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周炜	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	35	251	9.0	14.0
2	曹文静	华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科	23	108	6.0	9.0
3	陈莉莉	华中科技大学同济医学院附属同济医院老年科	51	312	11.0	14.0
4	郭小梅	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	74	543	12.0	18.0