侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

• 作者: 侯春喜 刘金亮 张世宏 潘洪玉 王凤婷 魏毅
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜花叶病毒 辣椒 CP基因 序列分析 原核表达 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 110-115
• 分类号: S6
• 字数: 5362字
• 语种: 中文

摘要

从吉林长春感病辣椒上获得一黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分离物(CMV-CC),根据GenBank中已登录的CMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列设计简并引物,通过RT-PCR的方法克隆到了长度为657 bp的目的片段.序列分析表明,CMV-CC与CMVI组各分离物核苷酸同源性为93.2%-97.9%.根据完整CP 基因核苷酸序列构建的系统进化树显示:38个CMV分离物可分为3个组,CMV-CC属于CMV的IB亚组.将CMV-CC CP基因与原核表达载体pET-22b(+)连接,在大肠杆菌BL21 (DE3)诱导表达出分子量约27 kD的融合蛋白.表达的融合蛋白经树脂纯化后免疫家兔制备了抗血清.用间接ELISA测定抗血清效价为1/4 096.Western blotting分析表明制备的抗血清对CP有高度特异性,为准确、快速地检测CMV奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘金亮	吉林大学植物科学学院	33	205	8.0	13.0
2	魏毅	吉林大学植物科学学院	9	41	4.0	6.0
3	潘洪玉	吉林大学植物科学学院	55	329	9.0	16.0
4	张世宏	吉林大学植物科学学院	15	95	6.0	9.0
5	侯春喜	吉林大学超分子材料与结构国家重点实验室	7	39	3.0	6.0
6	王凤婷	吉林大学植物科学学院	6	36	3.0	6.0