小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养条件优化及功能测试

• 作者: 吴新荣 臧路平
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 肾脏 近端小管 上皮细胞 原代培养 尿酸吸收
• 年，卷（期）: 2010,（50）
• 页码范围: 9358-9360
• 分类号: R318
• 字数: 3331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.50.012

摘要

背景:好的肾脏近端小管上皮细胞原代培养方法能够为药物筛选、机制研究等提供模型基础.目的:探索小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养的最佳处理条件,并对其进行尿酸吸收功能测试.方法:无菌取小鼠肾脏,去除外膜及脂肪组织,切取近端皮质部分,机械破碎,Ⅰ型胶原酶消化,依次过50目,100目筛网过滤,Percoll密度梯度离心法分离肾小管节段,接种至一次性细胞培养瓶.制备细胞爬片,SP法染色鉴定细胞.在1 500 μmol/L尿酸浓度下,以不同浓度梯度的丙磺舒和苯溴马隆作为指示药物,检测细胞尿酸吸收及作为药物作用体外模型功能.结果与结论:经机械破碎的肾脏近端皮质组织在400 U胶原酶处理20 min时,肾小管节段贴壁率达到最高为54.5%;首次换液最佳时间为72 h;细胞在原代培养第5天生长达到对数期,在第10天状态开始有所下降,折光率低,出现部分漂浮死亡细胞.在1 500 pmol/L尿酸浓度的吸收培养基中,吸收实验进行30 min时,其对尿酸吸收速率达到最大.指示药物丙磺舒和苯溴马隆在不同的浓度F,对于尿酸吸收的抑制率不同,其中苯溴马隆的抑制率要高于丙磺舒.提示在上述分离培养条件下能够培养出数量多、活性高的目的细胞,并且具有良好的尿酸吸收功能,在一定的尿酸和药物浓度下,能够作为研究药物作用的体外细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴新荣	华南理工大学轻工与食品学院	12	45	3.0	6.0
5	臧路平	华南理工大学轻工与食品学院	3	79	3.0	3.0