猪akirin2基因的克隆与真核表达

• 作者: 张德礼 曹金锁 柳超 蒋朋飞 赵振华 陈新雨
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: akirin2基因 克隆 染色体定位 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 11-13
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2010.08.004

摘要

Trizol法从猪脾脏中提取总RNA,RT-PCR方法得到猪Akirin2的完整编码区,软件分析猪Akirin2的核酸序列与蛋白序列,进行染色体定位.将Akirin2构建到带有荧光标记的真核表达载体pEGFP-C1中,通过脂质体转染法将pEGFP-Akirin2转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC)中进行表达.结果表明,该序列编码203个氨基酸, 猪akirin2基因定位于猪1号染色体,含有4个外显子,猪与牛的Akirin2蛋白高度同源.重组表达质粒pEGFP-Akirin2经双酶切鉴定和测序分析,表明构建成功,pEGFP-Akirin2转染SUVEC细胞后,经荧光检测证实转入的akirin2基因得到表达.研究结果为探讨猪Akirin2蛋白在免疫调控中的功能提供了基础数据.