马疱疹病毒gD蛋白主要抗原域的表达及初步应用

• 作者: 何剑斌 侯玉杰 时成龙 李红梅 相文华 赵立平 郭巍
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 马疱疹病毒 gD蛋白 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 12-15
• 分类号: S852.65+9.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2010.06.004

摘要

根据GenBank马疱疹病毒1型(EHV-1)和4型(EHV-4)gD基因进行分析,选取同源性较高且抗原性强的C端序列设计一对引物进行扩增.将扩增的基因插入pET-30a的BamHⅠ和SalⅠ之间构建原核表达载体pET-gD.然后将pET-gD质粒转化至BL21(DE3)宿主菌,对培养和表达条件进行优化,实现EHV gD蛋白主要抗原区域的高效表达.将重组pET-gD蛋白进行纯化并接种长白兔制备高免血清.经免疫印迹试验鉴定,证实所得纯化表达产物具有良好的抗原性.