两种方法介导外源基因稳定转染大鼠肝癌细胞株的有效性及其对细胞生长影响的比较

• 作者: WANG Jin YANG Tian-yan ZHANG Jing-xian 张靖贤 杨天燕 王乃平 王劲 韦锦斌
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 真核表达载体 基因转染 稳定转染 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1785-1789
• 分类号: Q331|Q786
• 字数: 3993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2010.10.003

摘要

目的 探讨磷酸钙共沉淀法与阳离子脂质体试剂形成复合物法两种基因转染方法构建大鼠肝癌细胞克隆株的有效性及对生长影响的比较.方法 将携带增强型绿色荧光蛋白的真棱表达我体pEGFP-N1分别用脂质体形成复合物法、磷酸钙共沉淀法导入大鼠肝癌CBRH-7919细胞,G418筛选基因稳定转染阳性单细胞克隆株.RT-PCR法检测EGFP基因在细胞中的表达.结果 两种方法转染CBRH-7919细胞24h后,倒置相差荧光显微镜下观察均见绿色荧光.G418加压筛选14d后均形成阳性克隆,倒王相差荧先显微镜下可见绿色荧光,脂质体法的细胞克隆荧光强度强于磷酸钙.阳性克隆株经RT-PCR法检测,750bp于450bp处均有特异性条带.结论 两种细胞转染方法均可使增强型绿色荧光蛋白基因稳定转染CBRH-7919,为今后探讨外源目的 基因对靶细胞生长特性的影响奠定前期实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王乃平	广西医科大学第一附属医院药剂科	32	282	10.0	15.0
2	韦锦斌		68	379	11.0	17.0
3	杨天燕	广西医科大学第一附属医院药剂科	31	80	5.0	7.0
4	张靖贤	广西医科大学第一附属医院药剂科	17	60	4.0	7.0
5	YANG Tian-yan	广西医科大学第一附属医院药剂科	1	1	1.0	1.0
6	WANG Jin	广西医科大学第一附属医院药剂科	1	1	1.0	1.0
7	王劲		1	1	1.0	1.0
8	ZHANG Jing-xian	广西医科大学实验中心	1	1	1.0	1.0