慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响

• 作者: 钱伟峰 阮坚丽 高源 黄海
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体系统 shRNA 大肠癌细胞 STAT3
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 页码范围: 21-24
• 分类号: R735.3
• 字数: 3034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2010.19.006

摘要

目的 观察慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响.方法 将pRNAT-shSTAT3重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度,感染大肠癌HT-29细胞,筛选获得阳性细胞株,实时定量PCR和Western blot 检测shRNA对STAT3基因的沉默效率, MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功包装慢病毒,其病毒悬液的滴度为2×107 TU/mL.病毒液感染大肠癌HT-29细胞,经G418筛选获得稳定细胞株,实时定量PCR和Western blot结果分别显示HT-29细胞STAT3mRNA表达和蛋白明显减弱,表达量分别为(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P＜0.01).MTT结果显示STAT3基因沉默后的大肠癌HT-29细胞生长明显减慢, G0/G1期细胞占(68.73±2.88)%, S期细胞占22.93±1.10%, 与对照组相比差异显著(P＜0.01).结论 慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长有明显的影响,细胞生长速度明显减慢,细胞阻滞于G0/G1期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄海	江苏省苏州市立医院本部普外科	7	35	2.0	5.0
2	钱伟峰	江苏省苏州市立医院本部普外科	8	27	3.0	5.0
3	高源	江苏省苏州市立医院本部普外科	5	10	2.0	3.0
4	阮坚丽	江苏省苏州市立医院本部普内科	2	1	1.0	1.0