负载LMP-1基因的树突状细胞诱导CTL对鼻咽癌细胞的杀伤效应

• 作者: 吕成伟 尤长宣 廖旺军 徐瑞凤 石敏 罗荣城
• 来源期刊: 河北医学
• 学科: 医学
• 关键词: 超声微泡造影剂 树突状细胞 基因转染 鼻咽癌 免疫治疗
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1409-1413
• 分类号: R73
• 字数: 3704字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6233.2010.12.001

摘要

目的:探讨超声联合微泡造影剂能否增强绿色荧光蛋白(GFP)质粒pEGFP-C3-LMP-1转染树突状细胞(Dendritic cells,DC),进而探讨转染LMP-1基因的DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对鼻咽癌(NPC)细胞株的体外杀伤作用.方法:体外培养的人DC分为四组:①单纯质粒组(A组):加入质粒;②超声照射组(B组):质粒+超声辐照;③微泡造影剂组(C组):质粒+微泡造影剂;④超声+微泡造影剂组(D组):质粒+微泡造影剂+超声辐照.荧光显微镜观察GFP质粒在DC内的表达,流式细胞仪评价GFP质粒的转染效率.另将体外培养的DC分为两组用于检测DC表面表型的表达及体外杀伤实验:①空白对照组,单纯培养的DC;②基因转染组,具体实验方法同上述D组.流式细胞仪检测DC表面分子表型的表达.DC和T细胞混合共培养获得的CTL为效应细胞,LMP-1表达阳性的NPC细胞株C666-1为靶细胞,按效靶比10:1的比例混合培养24h后,MTT法检测CTL对靶细胞的杀伤作用.结果:D组DC内有较多的绿色荧光表达,且转染效率最高(14.86±2.36)%,和其余各组均有显著性差异.LMP-1基因转染组DC表面标志CD80、CD83、CD86、CD40、HLA-DR的表达明显高于对照组,所诱导产生CTL对靶细胞有明显的杀伤作用,其杀伤效率为(41.72±3.53)%,明显高于空白对照组(7.62±2.36)%.结论:超声联合微泡造影剂可有效地介导GFP质粒转染DC.LMP-1基因转染组DC诱导产生特异性的CTL对靶细胞有明显的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗荣城	南方医科大学南方医院肿瘤中心	287	1892	18.0	29.0
2	尤长宣	南方医科大学南方医院肿瘤中心	49	190	7.0	12.0
3	石敏	南方医科大学南方医院肿瘤中心	28	123	6.0	9.0
4	吕成伟	南方医科大学南方医院肿瘤中心	37	135	7.0	8.0
5	廖旺军	南方医科大学南方医院肿瘤中心	55	204	9.0	11.0
6	徐瑞凤	南方医科大学南方医院肿瘤中心	5	14	3.0	3.0