兔膝关节软骨细胞的分离培养及形态学特征

• 作者: 唐德志 张有为 王世伟 王拥军 胡志俊 胡波
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 兔 关节软骨 软骨细胞 细胞分离 细胞培养 组织构建
• 年，卷（期）: 2010,（46）
• 页码范围: 8555-8558
• 分类号: R318
• 字数: 5040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.46.002

摘要

背景:软骨细胞是软骨破坏过程中的靶细胞,也是分泌炎性细胞因子的主要细胞之一,体外分离培养骨关节炎软骨细胞存在难度.目的:对兔膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察兔软骨细胞的形态学特性.方法:4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法,通过调整胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶的浓度及消化时间来获得较纯的关节软骨细胞,传代培养.通过倒置相差显微镜下观察细胞形态、绘制生长曲线、苏木精-伊红染色、阿利新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色对细胞进行鉴定.结果与结论:原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主,传代3次后出现反分化.形态学、免疫荧光染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定,90%以上的软骨细胞维持多角形或三角形,核为圆形或椭圆形.苏木精-伊红阳性染色为细胞核呈紫蓝色,软骨细胞基质红染,胞浆及细胞周围有紫红色、阿利新蓝染色可见细胞浆和胞膜呈深蓝色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色可见胞浆和胞膜清晰绿色荧光,细胞核区域未见明显绿色荧光.结果提示,实验成功建立了软骨细胞分离、培养体系,且3代以内90%以上的软骨细胞生长良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王拥军	上海中医药大学脊柱病研究所	250	3067	29.0	44.0
2	胡志俊	上海中医药大学脊柱病研究所	82	586	13.0	22.0
6	胡波	上海中医药大学脊柱病研究所	4	65	3.0	4.0
7	唐德志	上海中医药大学附属龙华医院骨伤科	30	234	10.0	15.0
8	张有为	上海中医药大学附属龙华医院骨伤科	6	65	3.0	6.0
9	王世伟	上海中医药大学附属龙华医院康复科	9	68	3.0	8.0