犬骨髓间充质干细胞片层的体外培养与制备

• 作者: 李宁毅 荆恒 谭帅 陈立强 高振华
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 温度反应性培养皿 培养 制备 细胞片层 骨组织工程 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1825-1828
• 分类号: R394.2
• 字数: 3251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.10.024

摘要

背景:传统的组织工程方法在收获和转移细胞方面存在诸多不足,且难以形成致密的组织,明显限制了组织工程学的发展.目的:探讨犬骨髓间充质干细胞片层的体外培养与制备方法.方法:实验犬麻醉后抽取骨髓,采用密度梯度离心法体外分离骨髓间充质干细胞.取传至第4代细胞,按1×10~9 L-1密度接种于商径3.5 cm的温度反应性培养皿中,置于37℃、体积分数为5%的CO_2饱和湿度培养箱内培养,待细胞增殖融合时再将培养皿的温度降至20℃培养20 min,倒置显微镜下观察细胞形态学变化及细胞片层形成情况.结果与结论:犬骨髓间充质干细胞原代培养24 h呈椭圆形或多角形,72 h多数细胞伸展贴壁,7 d时形成细胞集落,12 d时细胞呈长梭形,完全融合,细胞界限不清.温度反应性培养皿中的骨髓间充质干细胞在降温至20℃时,细胞形态发生变化,呈短梭形,且逐步从培养皿底分离,形成含细胞外基质的完整的细胞片层.证实密度梯度离心法可成功分离培养犬骨髓间充质干细胞,通过改变应用温度反应性培养皿的温度,能获取完整的细胞片层.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宁毅	青岛大学医学院附属医院口腔颌面外科	198	905	12.0	18.0
2	高振华	青岛大学医学院附属医院口腔颌面外科	23	120	7.0	9.0
3	陈立强	青岛大学医学院附属医院口腔颌面外科	36	254	10.0	14.0
4	荆恒	青岛大学医学院附属医院口腔颌面外科	11	62	5.0	7.0
5	谭帅	青岛大学医学院附属医院口腔颌面外科	5	24	3.0	4.0