焦磷酸测序技术快速测定肾移植受体人群CYP3A5*3基因多态性方法的建立

• 作者: 佘兴国 叶启发 周宏灏 成柯 明英姿 朱利军 李定云 李智 王果 赵于军
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 焦磷酸法测序 CYP3A5*3多态性 肾移植
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 2302-2306
• 页数: 5页
• 分类号: R617
• 字数: 3635字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立基于焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)肾移植受体CYP3A5*3基因多态性的简单、快速、准确、高通量的检测方法.方法 提取221例肾移植受体和200例健康人外周血基因组DNA,应用PyroMark ID焦磷酸测序仪进行焦磷酸测序,采用Sanger法DNA测序作为标准对照,观察分析焦磷酸测序法的可靠性,并分析肾移植受体人群CYP3A5*3多态性的分布.结果 建立了基于焦磷酸测序技术的CYP3AS*3基因多态性检测新方法,实现了DNA标本的快速、可靠、高通量检测,经重复性检测和Sanger标准法DNA测序可靠性检测,用焦磷酸测序技术检测CYP3A5*3多态性的突变检出率及重复率均达100%.221例肾移植受体CYP3AS*3基因型分布:*1/*1型为23例(10.4%),*1/*3型为89例(40.3%),*3/*3型为109例(49.3%),与正常人群比较等位基因分布符合Hardy-Weinberg平衡.结论 与传统的测序方法相比,焦磷酸测序法能够简单、快速、准确地测定肾移植受体CYP3A5*3基因型,适合临床推广应用.