BCR/ABL融合基因表达检测技术建立及其初步应用

• 作者: 刘文涛 吴苹 夏增亮 夏庆杰 张发强 张锐 徐峰 李健 李军 李启杰 胡迪 郝素菊 陈清英
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 双色荧光定量PCR BCR/ABL融合基因 慢性粒细胞白血病
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1597-1599
• 分类号: Q78
• 字数: 2478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2010.11.009

摘要

目的 建立BCR/ABL融合基因表达定量分析的双色荧光定量PCR技术;探讨所建立的双色荧光定量PCR技术在CML早期诊断中的临床应用特点.方法 据BCR/ABL融合基因序列,设计合成BCR/ABL融合基因及ABL基因特异的引物TaqMan探针.提取患者骨髓细胞标本总RNA,逆转录成cNDA;在同一PCR反应管中同时进行两种基因的双色荧光定量PCR反应,分别定量测BCR/ABL融合基因和ABL基因的表达量,并计算两种基因表达的比值.检测标本中两种基因的表达量,计算检测的阳性率,所得结果与临床诊断结果对比,以判断该技术在CML检测诊断中的价值.结果 成功地建立了BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR技术方法;在35例临床CML患者中,33例检出融合基因阳性,检测阳性率94.3%;12例正常人cDNA均未检出融合基因阳性.结论 所建立的BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR是一种快速、准确、高通量而费用又较为低廉的基因检测技术,该技术检测CML具有临床可行性.