携带Bclxl基因的重组腺相关病毒的制备和鉴定

• 作者: 卢光琇 彭炬 李工博
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Bclxl基因 重组腺相关病毒 树突细胞
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-36,49
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:制备携带Bclxl基因的重组腺相关病毒,并鉴定其感染细胞有效性.方法:抽提BALB/c小鼠脾脏总RNA,通过RT-PCR获得cDNA,然后设计引物通过PCR获得Bclxl基因的编码序列.将得到的Bclxl编码序列插入腺相关病毒质粒pAAV-MCS中的多克隆位点,从而构建出重组腺相关病毒质粒pAAV-Bclxl.将质粒转染细胞后使用Western Blot和流式分析检测Bcixl蛋白的表迭.进一步包装制备了携带Bckl基因的重组腺相关病毒颗粒,用其感染HT1080细胞后用流式细胞仪分析了感染前后细胞中Bclxl基因的表达情况.结果:质粒转染后细胞中Bclxl蛋白的表达水平显著高于转染前,病毒感染后细胞中Bclxl蛋白的表达水平显著高于感染前.结论:携带Bclxl基因的重组腺相关病毒颗粒包装成功,能高效感染细胞,为后续的遗传改造树突细胞打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢光琇	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	208	1251	18.0	24.0
2	彭炬	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	4	2	1.0	1.0
3	李工博	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	2	0	0.0	0.0