靶向人血管内皮生长因子-C基因的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 张雅洁 谢晓斌 陈小卫 龙捷
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 血管内皮生长因子C 短发夹RNA 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 544-547
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 4238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.04.008

摘要

目的:构建靶向人血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因的shRNA真核表达载体并检测其对靶基因的沉默效应.方法:根据靶基因VEGF-C序列,设计、合成编码其shRNA的互补寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSIREN-RetroQ载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MCF-7细胞株,荧光定量PCR及Westen-blot检测其对靶基因VEGF-C表达的影响.结果:酶切及测序鉴定重组质粒pSIREN-VEGF-C的序列正确;转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P＜0.05).结论:成功构建了靶向人VEGF-C基因的shRNA真核表达载体,并在乳腺癌MCF-7细胞中高效、特异地发挥靶基因沉默作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雅洁	广州医学院病理教研室	54	405	11.0	18.0
2	谢晓斌	广州医学院病理教研室	22	73	5.0	7.0
3	陈小卫	广州市第一人民医院血液内科	14	48	4.0	6.0
4	龙捷	广州医学院病理教研室	25	76	5.0	7.0