裂殖壶菌鲨烯合酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张学成 朱清华 朱路英
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 裂殖壶菌 鲨烯合酶 cDNA 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 页码范围: 263-267
• 分类号: Q786
• 字数: 4683字
• 语种: 中文

摘要

为探讨裂殖壶菌烯合酶基因的克隆,以及在大肠杆菌中的表达.采用简并引物与RACE相结合的方法从裂殖壶菌(Schizochytrium limacinum)中克降出鲨烯合酶基因.分析表明该基因的cDNA全长包括1672个核苷酸,编码一个含446个氨基酸的开放阅读框;在裂殖壶菌中以单拷贝的形式存在.同源分析显示裂殖壶菌鲨烯合酶的氨基酸序列中含有5个保守基序.将裂殖壶菌鲨烯合酶的cDNA序列连接到原核表达载体pGEX-4T-3上构建融合表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示,诱导表达出的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,其相对分子质量与预期相符;且融合蛋白具有一定的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学成	中国海洋大学海洋生命学院	122	1664	22.0	34.0
2	朱路英	鲁东大学生命科学学院	12	253	8.0	12.0
6	朱清华	德州学院生物系	8	17	3.0	4.0