转录因子E2F-1过表达抑制胃癌细胞MGC-803的增殖

• 作者: 尹永硕 李雷 王长青 肖强 谢玉波
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: E2F-1 胃癌 MGC-803细胞 细胞增殖 转录因子
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 页码范围: 2616-2619
• 分类号: R73
• 字数: 3523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2010.20.005

摘要

目的 了解E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖、生长和细胞周期的影响.方法 PCR扩增E2F-1基因片段,然后经限制性内切酶 EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选.用脂质体Lipofectamine 2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株.RT-PCR和Western blot技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达的情况.对稳定转染E2F-1的胃癌MGC-803/E2F-1细胞(实验组)、转染空载体的MGC-803/EV(阴性对照组)及未转染的MGC-803细胞进行MTT法检测,绘制生长曲线和计算细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞周期分布.结果 RT-PCR和Western blotting 实验证实重组载体pCMV-E2F-1-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1.MTT法检测发现,与MGC-803/EV细胞组和MGC-803细胞组相比,胃癌MGC-803/E2F-1细胞的生长受到明显抑制,增殖率下降(26.61±5.19)% vs(93.4±10.29)%、(100±0.00)%(均P<0.01);细胞周期分析显示MGC-803/E2F-1组的细胞在G0/G1期所占比例为70.70%,高于MGC-803/EV组(59.60%,P<0.01)和MGC-803细胞组(1.40%,P<0.01);MGC-803/E2F-1组的细胞在S期所占比例为17.60%,明显低于MGC-803/EV组的30.70%(P<0.01)和MGC-803细胞组的27.30%(P<0.01).结论 E2F-1基因过表达抑制胃癌细胞的增殖和生长,细胞周期停滞在G0/G1期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雷	广西医科大学附属第一医院胃肠腺体外科	27	95	6.0	7.0
2	谢玉波	广西医科大学附属第一医院麻醉科	154	576	10.0	13.0
3	肖强	广西医科大学附属第一医院胃肠腺体外科	104	361	9.0	11.0
4	王长青	广东省深圳市宝安区人民医院肿瘤科	5	9	1.0	3.0
5	尹永硕	广东省东莞市人民医院肿瘤外科	1	0	0.0	0.0