猪链球菌2型ABC转运蛋白gene0910敲除突变体的构建及活性分析

• 作者: 姜永强 袁媛 郑玉玲 郭洁 骈亚亚
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪链球菌2型 89K毒力岛 ABC转运蛋白 基因敲除
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-10
• 分类号: Q939.93
• 语种: 中文

摘要

目的:构建猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)强毒株05ZYH33 89 K毒力岛上的ABC转运蛋白gene0910敲除突变体,并初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础.方法:以猪链球菌2型05ZYH33基因组为模板,扩增gene10910两侧各约500 bp左右的片段为上下游同源臂,以psET1质粒为模板,扩增氯霉素抗性基因Cm为中间片段,采用重叠PCR方法搭建三个片段,并克隆到自杀载体pSET4S上,构建基因敲除的载体.电转化05ZYH33感受态细胞,经30℃双交换和40℃质粒丢失,最后点板法筛选出基因敲除突变体△0910.对突变株和野生株的生物学活性及小鼠的致病性进行了初步比较.结果:PCR分析和测序结果均显示gcne0910完全被氯霉素抗性基因Cm所替代,基因敲除突变体构建成功.结论:突变株的生物学活性和对小鼠的致病性与野生株相比差异不显著.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑玉玲	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	33	110	6.0	9.0
2	姜永强	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	44	201	7.0	11.0
3	郭洁	华中农业大学食品科技学院	2	5	2.0	2.0
4	袁媛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	5	15	3.0	3.0
5	骈亚亚	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	3	9	2.0	3.0