葡萄5BB品种SRAP-PCR反应体系影响因素

• 作者: 修景润 廉美兰 朴炫春 金美玉
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄"5BB"品种 SRAP 正交设计 优化
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 页码范围: 33-37
• 分类号: S663.1
• 字数: 2688字
• 语种: 中文

摘要

为建立适合葡萄5BB品种的SRAP-PCR反应体系,利用正交设计对葡萄SRAP-PCR反应体系5种因素(Taq DNA聚合酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)4个水平进行优化.结果表明,各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小顺序为:Mg2+,引物,dNTP,TaqDNA聚合酶,模板DNA;筛选出各因素的最佳水平,建立了葡萄5BB品种SRAP-PCR反应的最佳体系(20 μL)为:Taq DNA聚合酶2 U,Mg2+2.0 mmol/L,模板DNA 60 ng,dNTP 0.25 mmol/L,引物0.10 μmol/L.这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对葡萄进行相关研究提供了帮助.