人脐带血间充质干细胞的分离培养及增殖及增殖能力

• 作者: 杨依勇 秦书俭 郑德宇 闫曼
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期 生长增殖 活性 脐血 间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 1739-1742
• 分类号: R394.2
• 字数: 4286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.10.006

摘要

背景:随年龄的增加,骨髓来源的间充质干细胞在数量和质量上均受到影响,并对供体损伤较大,寻找替代的间充质干细胞来源成为研究热点,而脐带血中是否含有间充质干细胞仍存在争议.目的:拟从人脐带血中分离培养间充质干细胞,并对其生物学特性进行检测.方法:无菌条件下,应用Percoll密度梯度离心法分离脐血标本,收获中间层细胞,加入含胎牛血清、青霉素和链霉索、L-谷氨酰胺的DMEM基础培养液,再经反复贴壁纯化,除去悬浮生长细胞,得到较多呈融合状态的贴擘细胞,待细胞达60%～80%融合时胰酶消化传代.分别取第1,5,9代细胞,观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞活性.结果与结论:分离的脐血间充质干细胞大小均匀,呈梭形或星形的成纤维细胞样细胞.第1,5,9代脐带血间充质干细胞高表达CD29,CD105和CD166,低表达CD34和CD45:接种后5 d细胞进入指数增生期,9 d后数量减少,群体倍增时间为(53.5±8.32)h;细胞生长状态良好,在细胞活力方面1～7代摹本相似(P＞0.05),至第9代细胞增殖活力稍下降,但仍无明显差异(P＞0.05).结果证实可在体外成功从脐血中分离培养出间充质干细胞,第1～9代细胞均具有良好的增殖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦书俭	辽宁医学院解剖学教研室	98	432	10.0	14.0
2	闫曼	辽宁医学院附属一院手外科	2	8	2.0	2.0
3	杨依勇	辽宁医学院解剖学教研室	9	45	4.0	6.0
4	郑德宇	辽宁医学院解剖学教研室	41	120	6.0	8.0