花椰菜的ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 侯栋 张东琴 朱慧霞 胡立敏 陶兴林
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 花椰菜 ISSR反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术科学
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: S635.3
• 字数: 2565字
• 语种: 中文

摘要

以花椰菜基因组为材料,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如dNTPs浓度,DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量,引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合花椰菜的ISSR-PCR反应体系:25μL反应体积:内含10×PCR反应缓冲液(含Mg2+)2.5μ、0.5U TaqDNA聚合酶、0.2mmol/LdNTPs、0.5μmol/L引物、60ng模板DNA.确定了适宜的退火温度为48.6℃.扩增程序为94℃预变性5 min;然后94℃变性30s,46.9℃退火45 S,65℃延伸1.5min,35个循环;最后65℃延伸7min,4℃保存.用120条引物对花椰菜基因组进行标记,筛选出引物TI-13可以将这6份花椰菜材料区分开.花椰菜ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行花椰菜品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯栋	甘肃省农业科学院蔬菜研究所	44	138	6.0	9.0
2	胡立敏	甘肃省农业科学院蔬菜研究所	25	68	4.0	6.0
3	陶兴林	甘肃省农业科学院蔬菜研究所	34	106	5.0	8.0
4	张东琴	甘肃省农业科学院蔬菜研究所	22	37	4.0	4.0
5	朱慧霞	甘肃省农业科学院蔬菜研究所	1	4	1.0	1.0