兔主动脉内皮细胞培养及鉴定:内皮细胞分离方式及培养条件的改良

• 作者: 关春艳 高航
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮细胞 细胞培养 鉴定 酶消化 血管组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 1919-1922
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 4538字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.11.005

摘要

背景:获取内皮细胞的方法有机械刮取、组织块移植和酶消化法3种.一直以来,内皮细胞的培养方法也在不断的更新.目的:探讨兔主动脉内皮细胞的培养和鉴定方法.方法:取1周龄新西兰大耳白兔主动脉,剥去外膜,内膜面向下铺入2 g/L Ⅰ型胶原酶、2 g/L Ⅲ型胶原酶,2 g/L Ⅳ型胶原酶和2 g/L Ⅴ型胶原酶混合消化液中(按1:1:1:1:1混合)消化20min,按1:1加入培养基以终止消化.轻轻刮下内膜层细胞,将细胞悬液离心,用DMEM培养液(含胎生血清20%、VEGF 1 μg/L、bFGF 2 μg/L,庆大霉素6 U/L)混匀沉淀细胞,吹打分散至单个细胞培养,48 h后用首次换液.再按1:2分瓶传代培养.采用倒置相差显微镜观察细胞培养结果.免疫组织化学及免疫荧光鉴定Ⅷ因子相关抗原.电镜观察Weibel-Paladed小体.结果与结论:体外获得并培养5代内皮细胞.Ⅷ因子相关抗原及电镜观察W-P小体均证实实验成功的培养了原代及传代内皮细胞.提示兔主动脉内皮细胞可从主动脉获得并通过培养成为细胞系,Ⅷ因子相关抗原及电镜观察W-P小体联合鉴定是确定内皮细胞的良好方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高航	辽宁医学院附属第一医院心内科	30	105	6.0	9.0
2	关春艳	辽宁医学院附属第一医院心内科	5	17	2.0	4.0