pAAV-PEG3-sTRAIL质粒的构建及表达研究

• 作者: 卢光琇 彭炬 潘艺 蒋祥龙
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PEG3 sTRAIL 凋亡 胚胎干细 NTERA-2
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 481-484,489
• 页数: 5页
• 分类号: R321
• 字数: 2543字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pAAV-PEG3-sTRAIL质粒并检测其诱导细胞凋亡的作用.方法 从大鼠尾巴中提取gDNA,PCR扩增PEG3启动子,测序后定向替代pAAV载体中的CAG启动子.从培养的NTERA-2细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增sTRAIL基因(编码氨基酸序列114-281),测序后定向插入至pAAV-PEG3质粒的多克隆位点.用pAAV-PEG3-sTRAIL质粒FUGENE HD转染人hSF、NTERA-2和hES细胞,用半定量RT-PCR和流式细胞仪分别检测sTRAIL基因的表达和细胞的早期凋亡.结果 限制性内切酶酶切和测序分析证实,本文成功地获得了PEG3启动子和sTRAIL基因片断,并将PEG3和sTRAIL准确插入了pAAVL质粒.转染hSF、NTERA-2和人胚胎干细胞(hES)后,检测到sTRAIL基因的表达及其引起的肿瘤细胞NTER-A-2的早期凋亡.结论 成功构建了pAAV-PEG3-sTRAIL质粒,并有可能用于肿瘤的基因治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢光琇	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	208	1251	18.0	24.0
2	潘艺	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	8	9	1.0	2.0
3	蒋祥龙	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	3	6	1.0	2.0
4	彭炬	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	4	2	1.0	1.0