人巨细胞病毒UL123基因外显子4诱饵质粒的构建与鉴定

• 作者: 文兰 李一柯 罗敏华 陈利玉
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 外显子4 克隆 细菌双杂交系统
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 689-691
• 页数: 3页
• 分类号: R349.65
• 字数: 2252字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建和鉴定人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因外显子4(ie1-exon4)的诱饵质粒,并评价其用于细菌双杂交系统筛选文库的可行性.方法 以重组质粒pTWIN1/ie1为模板扩增ie1-exon4,克隆入pBT质粒,转化E.coli XL1-Blue MRF'Kan,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,提取阳性重组质粒,再转化入细菌双杂交系统报告茵株,诱导表达重组融合蛋白,用SDS-PAGE和Western Blot对表达产物进行鉴定,并进一步鉴定重组子自身激活作用.结果 细菌双杂交诱饵质粒pBT/ie1-exon4构建成功,并在报告菌株中表达了重组融合蛋白rIE1-C86-491/λC1,且pBT/ie1-exon4无自身激活作用.结论 成功构建了无自激活作用的诱饵质粒pBT/ie1-exon4,可用于筛选文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈利玉	中南大学湘雅医学院医学微生物学系	51	270	9.0	14.0
2	罗敏华	中南大学湘雅医学院医学微生物学系	22	124	6.0	10.0
3	李一柯	中南大学湘雅医学院医学微生物学系	4	10	2.0	3.0