胚胎大鼠神经干细胞分离培养及基因转染研究

• 作者: 于如同 孔令胜 赵万巨
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 细胞培养 基因重组腺病毒 转染
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 679-683,688
• 页数: 6页
• 分类号: R-332
• 字数: 4893字
• 语种: 中文

摘要

以低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)基因重组腺病毒体外转染胚胎大鼠神经干细胞,建立能稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞,为进一步的实验研究提供理论和物质基础.方法 ①分离SD大鼠胎鼠的间脑,加入神经生长因子EGF、bFGF和B27的神经干细胞务件培养基中克隆培养.通过检测神经干细胞的特异性抗原神经巢蛋白(nestin)、自我增殖能力和分化能力来鉴定神经干细胞;②用含有HIF-1α基因的腺病毒感染培养第2代的神经干细胞,通过绿色荧光蛋白的表达证明转染基因的表达,Western-blot检测转染后HIF-1α蛋白表达的变化,免疫原位杂交检测转染后HIF-1αmRNA 阳性细胞.结果 ①分离培养出了大量具有不断增殖能力的神经干细胞;②70%～80%的神经干细胞能感染HIF-1α基因重组腺病毒,Western-blot和免疫原位杂交实验显示HIF-1α蛋白大量表达.结论 成功建立了神经干细胞的分离培养方法及能长期稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵万巨	济宁医学院附属医院神经外科	15	33	4.0	5.0
2	于如同	徐州医学院附属医院神经外科	107	647	14.0	20.0
3	孔令胜	济宁医学院附属医院神经外科	28	91	5.0	8.0