miR375表达质粒构建及表达研究

• 作者: 刘律君 卢光琇 夏华强 彭炬 徐小明 潘艺
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒构建 pAAV-miR375 Hela细胞
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 652-655
• 页数: 4页
• 分类号: R-332
• 字数: 2762字
• 语种: 中文

摘要

目的 寻找一种高效、简便的构建表达miRNA质粒的方法.方法 该研究用PCR 方法直接从小鼠gDNA扩增了包含miRNA375(miR375)前体序列在内的一个126 bp片段以构建质粒pAAv-miR375.该研究用pAAV-miR375转染Hela细胞48 h后,用定量RT-PCR方法和Northern bloc检测Heh细胞中miR375的表达.结果 转染了pAAV-miR375的Hela细胞中有miR375的表达,而在转染了空质粒pAAV-MCS和未转染的Hela细胞中没有检测到miR375的表达.结论 该研究所构建的pAAV-miR375质粒能够表达miR-NA375.作者介绍的这一种构建表达miRNA质粒的方法比以往的方法更快速、高效、简便和保证序列的正确性.