人乳腺癌融合蛋白疫苗HSP65-HER2的表达、纯化及活性检测

• 作者: 万敏 于永利 卫红飞 张培因 曹昭 王丽颖 胡小平 高广宇
• 来源期刊: 中国妇幼保健
• 学科: 医学
• 关键词: 表达 纯化 热休克蛋白65 HER2表位
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 实验与基础研究
• 页码范围: 824-826
• 页数: 3页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文

摘要

目的:在大肠杆菌中表达、并纯化获得高纯度的融合蛋白疫苗HSP65-HER2.方法:经过酶切和序列分析后,将pET-28a-HSP65-HER2重组质粒转化Ecoli(BL21)中,经IPTG诱导产生6-his tag-HSP65-HER2融合蛋白,并通过Ni Sepharose 4B和Superdex G-25纯化.以纯化的重组融合蛋白免疫小鼠,取脾细胞经体外诱导后,采用CTL活性检测其活性.结果:成功的表达、纯化获得了高纯度的HSP65-HER2融合蛋白,CTL活性检测结果表明具有生物学活性.结论:获得了高纯度的HSP65-HER2融合蛋白,并证明其具有免疫学活性,为进一步研究其生物学活性奠定了基础.