环丙沙星单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 姜有声 方伟 杨先乐 王炼 胡鲲 黄宣运
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 医学
• 关键词: 环丙沙星 半抗原 抗体 免疫
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 16-20
• 分类号: R446.61
• 字数: 4248字
• 语种: 中文

摘要

通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物.利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环内沙星单克隆抗体,并对其效价、亲和力和特异性进行鉴定.结果表明:CIP-BSA的偶联比为30:1.经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,共筛出两株敏感、特异的杂交瘤细胞(JY-1、JY-2).这两株细胞的腹水经纯化后的抗体效价分别为5.12×106、2.56×106,亲和力常数分别为2.88×109、2.46×109L/mol,两抗体均为IgG1a,取亲和力高的JY-1进行竞争抑制测定,IC50值可以达到9.83ng/mL.该单抗仅与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为95%.通过验证得到的JY-1细胞株分泌的单克隆抗体可用于水产品中环丙沙星残留的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王炼		2	12	2.0	2.0