辣椒RAPD扩增体系的建立

• 作者: 刘录祥 孟凡娟 王雪 谢立波 郭亚华 高永利
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 辣椒 RAPD 优化
• 年，卷（期）: 2010,（34）
• 页码范围: 19272-19274
• 分类号: S641.3
• 字数: 2470字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.34.011

摘要

[目的]为辣椒的品种资源鉴定与遗传多样性分析奠定基础.[方法]采用改良的CTAB法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,并采用正交试验设计法对辣椒RAPD-PCR反应进行优化筛选.[结果]采用改良的CTAB法获得了高质量的辣椒基因组DNA,用Tris-平衡酚: 氯仿: 异戊醇(25: 24: 1,V: V: V)进行抽提,最后再用氯仿抽提以除去其中含有的酚,避免了对后续PCR扩增的影响.基于一般的RAPD反应程序和调整试验,优化了PCR反应体系.结果表明,在模板20 ng 1.5 μl、引物(20 μmol/L)1.5 μl、dNTPs(2.5 mmol/L)2.2 μl、10×Buffer缓冲液(含Mg2+)2.5 μl、Taq (5 U/μl) 0.35 μl条件下扩增效果较好.[结论]建立了最适的辣椒RAPD扩增体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭亚华		23	308	9.0	17.0
2	王雪		109	222	6.0	12.0
3	谢立波		37	256	10.0	15.0
4	孟凡娟	东北林业大学生命科学学院	63	405	10.0	18.0
5	高永利		10	15	2.0	2.0