利用12S rRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性鉴定动物种类

• 作者: 张惠媛 张昕 汪琦 赵大贺 陈广全 马海萍
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 限制性酶切末端片段长度多态性T-RFLP 种类鉴定 12SrRNA
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 214-219
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3632字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种精确可靠的鉴定常见的10种动物(猪、狗、牛、山羊、绵羊、马、鸡、鼠、三文鱼和鹿)的方法.方法:利用12S rRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)鉴别动物种类.将线粒体12S rRNA基因通过引物的5'端用FAM荧光标记,从基因组DNA中扩增450bp的目的片段.引物对1(下游引物FAM标记,上游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶Alu Ⅰ酶切.引物对2(上游引物FAM标记,下游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶Tru9 Ⅰ酶切.得到的酶切产物分别在遗传分析仪ABI 3100上进行毛细管电泳,片段大小用Peak Scanner 1.0软件分析.结果:根据Alu Ⅰ酶切图谱能够区分鸡、马、猪和三文鱼,而鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗因酶切图谱相同无法分开.根据Tru9 Ⅰ酶切图谱,能够进一步将鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗分开.同一种动物不同个体的酶切图谱完全相同,结果具有可重复性.没有出现物种内多态的现象.大多数情况下,实际得到的末端片段长度与理论值非常接近,只存在2～5bp的差异.结论:该方法操作简单、结果精确,适用于鉴定动物种类.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪琦		25	185	8.0	12.0
2	张昕		21	169	7.0	12.0
3	赵大贺	北京师范大学生命科学学院	1	11	1.0	1.0
4	马海萍	北京师范大学生命科学学院	1	11	1.0	1.0
5	陈广全		34	227	8.0	13.0
6	张惠媛		25	185	8.0	13.0