pGEX-4T-2-TK原核表达质粒的构建及其表达

• 作者: 吴敬波 杨斯皓 贾钰铭 钟俐强
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 自杀基因 质粒构建 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1036-1038
• 分类号: R730.54|R446.61
• 字数: 3157字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2010.09.005

摘要

目的 构建含胸苷激酶基因(TK自杀基因)的pGEX-4T-2-TK原核表达质粒,观察其在大肠杆菌中表达情况,为肿瘤基因治疗奠定基础.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增TK基因片段,利用限制性内切酶BamHⅠ和SalⅠ将其连接至原核表达载体pGEX-4T-2内,再将连接产物转化入大肠杆菌,挑取单菌落,提取质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序.将转化正确的大肠杆菌培养过夜,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后观察蛋白表达情况.结果 TK基因片段成功连接至载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌BL21中可得到稳定表达的目的 蛋白.结论 pGEX-4T-2-TK原核表达质粒构建成功,为后续肿瘤基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾钰铭	四川省宜宾市第二人民医院肿瘤科	44	123	5.0	9.0
2	钟俐强	四川省宜宾市第二人民医院肿瘤科	5	5	1.0	2.0
3	杨斯皓	四川省宜宾市第二人民医院肿瘤科	7	8	2.0	2.0
4	吴敬波	四川省宜宾市第二人民医院肿瘤科	1	3	1.0	1.0