人脐血间充质干细胞向类肝细胞分化:人肝细胞共培养诱导法的可行性?

• 作者: 刘吉勇 孙欣欣 张晓华 裴庆山 韩翠萍 高蕾
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 类肝细胞 共培养 诱导 脐血间充质干细胞 干细胞
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5261字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.01.011

摘要

背景:研究表明共培养条件下,骨髓间充质干细胞可向心肌细胞、肝样细胞等方向分化.目的:探讨人脐血间充质干细胞与人肝细胞在体外共培养条件下,诱导人脐血间充质干细胞分化为类肝细胞的可行性.方法:无菌条件下采集新生儿脐带血,采用密度梯度离心法与贴壁法分离纯化脐血间充质干细胞,待细胞融合至80%时胰蛋白酶消化传代.应用具有微孔滤膜的插入式细胞培养皿和培养板构建人脐血间充质干细胞-肝细胞共培养模型,脐血间充质干细胞按1×10~7 L~(-1)密度接种于下层6孔板内,LO2人肝细胞按1×10~5 L~(-1)密度接种到上层插入式培养皿中.以上、下两层均接种人脐血间充质干细胞作为对照组.采用流式细胞仪检测贴壁细胞的表面标志,倒置相差显微镜观察共培养后细胞形态变化,RT-PCR法检测肝细胞表面抗原mRNA的表达.结果与结论:贴壁细胞呈长梭形,强表达CD44和CD29,不表达造血细胞表型CD34和CD45.共培养组5 d时长梭形细胞数量减少,随共培养时间的延长,不规则圆形或多角形的细胞逐渐增多,与肝细胞形态相似;对照组培养4周时,人脐血间充质干细胞仍呈形态均一的长梭形.共培养组5 d时甲胎蛋白mRNA呈阳性表达,其余均为阴性;14 d时细胞角蛋白19 mRNA、白蛋白mRNA开始表达,随着时间延长有增强趋势,甲胎蛋白mRNA表达则较前减弱;对照组各抗原的表达均呈阴性.提示与LO2人肝细胞共培养后,人脐血间充质干细胞可诱导分化为类肝细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘吉勇	山东大学附属省立医院消化内科	27	251	8.0	15.0
2	孙欣欣	山东大学附属省立医院消化内科	7	31	4.0	5.0
3	韩翠萍	山东大学附属省立医院消化内科	4	25	3.0	4.0
4	张晓华	山东大学附属省立医院消化内科	6	43	4.0	6.0
5	高蕾		3	18	2.0	3.0
6	裴庆山	山东大学附属省立医院消化内科	7	74	4.0	7.0