小鼠血管紧张素转化酶2基因表达型载体的构建及体外表达

• 作者: 卢卓强 晋学庆
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素转化酶2基因 载体 COS7细胞 真核细胞 基因表达 组织构建
• 年，卷（期）: 2010,（46）
• 页码范围: 8600-8603
• 分类号: R318
• 字数: 4305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.46.012

摘要

背景:通过转基因疗法使血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme,ACE2)过度表达来治疗心血管病是当前ACE2研究的趋势,而构建含ACE2基因的载体则能为该研究方法提供工具.目的:构建含小鼠血管紧张素转化酶2基因的真核表达载体,并验证其蛋白的表达.方法:采用RT-PCR的方法从C57小鼠肾脏扩增出ACE2基因全长cDNA序列,并通过酶切连接和转化等分子生物学方法将其定向克隆至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,构建小鼠ACE2基因的真核表达载体pm-ACE2,并通过酶切及测序鉴定.通过脂质体转染法将所构建的pm-ACE2转染COS7细胞,并利用Western blot检测COS7细胞中ACE2蛋白的表达.结果与结论:通过测序并与GeneBank上的小鼠血管紧张素转化酶2序列(NM_27286.3)比对,证实实验成功克隆小鼠ACE2基因全长cDNA至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,测序结果提示存在3处同义突变;所构建的pm-ACE2在真核细胞中具有ACE2蛋白的表达.结果提示实验成功构建了小鼠ACE2基因真核表达载体,此载体具有表达ACE2蛋白的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	晋学庆	福建医科大学附属第一医院心血管内科	42	314	10.0	16.0
2	卢卓强	福建医科大学附属第一医院心血管内科	13	50	4.0	6.0