幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性

• 作者: 关锐梨 周珍文 夏慧敏 廖灿 谢永强 邓秋连 黄勇 龚四堂
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 尿素酶B 免疫活性
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 页码范围: 3673-3675
• 分类号: R4
• 字数: 3288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.20.005

摘要

目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性.方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中.0.5 mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠.ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性.结果:SDS-PAGE示在约87 kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51 200.Western blotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别.结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖灿		85	592	13.0	20.0
2	夏慧敏		44	213	7.0	12.0
3	周珍文		29	156	8.0	10.0
4	龚四堂		44	339	8.0	17.0
5	邓秋连		24	117	7.0	9.0
6	谢永强		29	142	7.0	10.0
7	黄勇		7	59	4.0	7.0
8	关锐梨		5	22	3.0	4.0