利用Cre/loxp技术构建血管内敲除cdc42基因杂合子小鼠

• 作者: 兰雨 孟莹 张琳 张磊 杨晓 胡国栋 蔡绍曦 陈英华
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠,基因敲除 Cre/loxp技术 cdc42 杂合子
• 年，卷（期）: 2010,（24）
• 页码范围: 4483-4486
• 分类号: R3
• 字数: 3312字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.24.015

摘要

目的:利用Cre/loxp条件性基因敲除技术构建血管内敲除ede42基因杂合子小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究edc42在维持微血管屏障中的作用提供研究平台.方法:将引进的edc42fkxx/fkxx小鼠和血管内皮细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠分别进行繁殖和鉴定,然后两种小鼠进行杂交,并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为Cdc42fkx/+Cre+/-的小鼠即为本实验所构建的血管内敲除edc42基因杂合子小鼠.结果:从引进这两种小鼠开始繁殖5个月,共繁殖edc42fkxx/fkx小鼠40只,取其21只进行鉴定,均为edc42flox纯合的子小鼠.血管内皮细胞特异性表达Ere重组酶的小鼠和野生型C57小鼠杂交后繁殖,共得到子代小鼠36只,其中表达Cre重组酶的小鼠17只,基因型为edc42fkxx/flox与表达Cre重组酶的杂合子小鼠杂交并繁殖,得到基因型为Cde42 fkxx/+Cre+/-的小鼠10只,基因型为Cde42fkox/Cre+/-13只.这两种基因型小鼠其身高、体重无明显差异.结论:本研究利用Cre/loxp技术成功构建了血管内敲除ede42基因杂合子小鼠.为进一步构建血管内敲除cdc42基因小鼠奠定基础,为在整体动物水平研究cdc42在维持微血管屏障中的作用提供研究平台.