单核细胞增多性李斯特菌iap基因的克隆、表达与p60蛋白的纯化

• 作者: 吕添 曹正茂 武海涛 王小红
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 单核细胞增多性李斯特菌 iap基因 克隆 表达 p60蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 157-161
• 分类号: Q786
• 字数: 3765字
• 语种: 中文

摘要

以单增李斯特菌基因组DNA为模板,利用自行设计的引物,通过PCR法扩增出单增李斯特菌的iap基因.在iap基因的5'端和3'端分别引入EcoR I和Xho I 2个酶切位点将其克隆到pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-18T-iap.经测序正确后,将iap基因克隆至表达载体pET-28a上构建表达质粒pET-28a-iap.在IPTG诱导下,携带pET-28a-iap的E.coli BL21(DE3)高效表达分子质量约为60kD的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白,其中可溶性蛋白占总p60蛋白含量的76.3%左右.诱导表达的可溶性蛋白通过Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在95.6%以上的重组p60蛋白,其提取率为68.3%左右.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小红	华中农业大学食品科学技术学院	55	626	14.0	24.0
2	吕添	华中农业大学食品科学技术学院	2	6	2.0	2.0
3	曹正茂	华中农业大学食品科学技术学院	2	6	2.0	2.0
4	武海涛	华中农业大学食品科学技术学院	2	6	2.0	2.0