酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的功能伙伴

• 作者: 邹俊华 钟南 霍丽蓉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 核不均一核糖核蛋白 酵母双杂交 蛋白质 相互作用子 质粒
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3714-3717
• 分类号: R318
• 字数: 4545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.20.024

摘要

背景:酵母双杂交系统3是目前最常用的筛选相互作用蛋白质的技术平台.目的:运用酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的相互作用子.方法:构建酵母细胞表达载体hnRNP E1-pGBKT7/c-myc,转化酵母菌AH109,Western blot证实蛋白表达,进行毒性和自激活检验,与转化了cDNA文库的酵母菌Y187接合,经过营养删除、滤膜反应以及回交试验筛选酵母文库中与hnRNP E1相互作用的蛋白.结果与结论:hnRNP E1蛋白能在酵母中正常表达,对酵母细胞无毒性,不存在自激活现象.经缺陷培养基3次传代及滤膜反应初步筛选出了16个候选基因,再经NCBI基因比对(BLASTN和BLASTP)及酵母细胞中的免疫沉淀反应最终获得了8个候选蛋白.提示hnRNP E1可能参与特定细胞内的复制,转录,mRNA运输、细胞周期、细胞自噬及免疫应答的过程,并且可能参与某些遗传病的发病过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	霍丽蓉	首都医科大学基础医学院生理学系	12	65	4.0	7.0
3	钟南	北京大学医学部基础医学院遗传系	13	131	4.0	11.0
6	邹俊华	北京大学医学部基础医学院遗传系	11	88	4.0	9.0